胰腺炎患者中血清淀粉酶的活性测定及临床意义

      【文献标识码】A【文章编号】1672-8602（2014）02-0192-01
　　淀粉酶（AMY或AMS）是能将多种糖化合物，其全称是1，4-α-D-葡聚糖水解酶，一般作用于可溶性淀粉、直链淀粉、糖元等α-1，4-葡聚糖，水解α-1，4-糖苷键的酶，在催化淀粉及糖原水解下，可生成葡萄糖、麦芽糖及含有α1，6-糖苷键支链的糊精。人体内只含有的淀粉酶属α-淀粉酶，又称淀粉内切酶。α-淀粉酶不仅作用于淀粉末端，还可作用于其内部的1，4-糖苷键，对1，4-糖苷键连接的葡聚糖具有特异性。但是不能水解1，6-糖苷键连接的葡聚糖。淀粉酶主要来源于胰腺和唾液腺，分别称为：p-AMY和s-AMY。此外肺、肝、甲状腺、脂肪等组织也含有α-淀粉酶。其测定主要为碘-淀粉比色法。
　　1临床资料
　　1.1一般资料： 本组收治临床上患有胰腺炎病人80例，其中男性48例，女性32例，年龄24～72岁。
　　1.2方法：采用碘-淀粉比色法检测。
　　1.2.1检验原理： 血清中α-淀粉酶催化水解，生成葡萄糖、麦芽糖和糊精。在底物充分（已知浓度）的条件下，未被水解的淀粉与碘液结合成蓝色化合物，其颜色的深浅与淀粉酶活性成反比。
　　1.2.2检验试剂：①缓冲淀粉液（0.4g/L） R1：称取9g氯化钠， 22.6g无水磷酸氢二钠和12.5g无水磷酸二氢钾，溶于约500ml蒸馏水中，加热至沸。R2：另：取一个小烧杯，精准称取0.4g可溶性淀粉，加入约10ml蒸馏水，混匀后，至溶液成糊状。将R：2加入之前沸腾的溶液R1中，水洗烧杯一并倒入。冷至室温后加入5ml 37%甲醛溶液，用蒸馏水稀释至1000ml。该缓冲液pH为7.0±0.1，放置冰箱保存。②碘贮存液（0.1mol/L） 称取1.7835g 碘酸钾和22.5g碘化钾溶于400ml蒸馏水中。缓慢加入4.5ml浓盐酸，边加边搅拌，用蒸馏水稀释至500ml，充分混匀后，贮存于棕色瓶内并塞紧，放置于冰箱保存。③碘应用液（0.01mol/L） 取碘贮存液，用蒸馏水稀释10倍，贮存于棕色瓶内，冰箱保存可用1个月。
　　1.2.3检验方法：①血清用生理盐水做10倍稀释；②取数支试管，标记测定管和空白管分别加入缓冲淀粉液1ml， 37℃预温5分钟；③测定管加入稀释血清0.2ml，混匀，将测定管和空白管置37℃水浴中7.5分钟；④测定管和空白管分别加入碘应用液1ml；⑤用蒸馏水调平，分别测定管加入6ml，空白管加入6.2ml，混匀；⑥用660nm波长，1cm光径，用蒸馏水调零，读取各管吸光度。
　　2结果
　　参考值：血清正常值800～1800U/L。
　　3讨论
　　α-淀粉酶广泛分布于动物（唾液、胰脏等）、植物（麦芽、山萮菜）及微生物。微生物的酶几乎都是分泌性的。α-淀粉酶以Ca2 为必需因子并作为稳定因子，既作用于直链淀粉，也作用于支链淀粉，无差别地切断α-1，4-链。因此，其特征是引起底物溶液粘度的急剧下降和碘反应的消失，最终产物在分解直链淀粉时以麦芽糖为主，此外，还有麦芽三糖及少量葡萄糖。另一方面在分解支链淀粉时，除麦芽糖、葡萄糖外，还生成分支部分具有α-1，6-键的α-极限糊精。一般分解限度以葡萄糖为准是35～50%，但是在细菌的淀粉酶中，也有呈现出高达70%分解限度的（最终游离出葡萄糖）。临床意义：急性胰腺炎、胰腺外伤、胰腺管组塞等疾患时，血清淀粉酶增加。特别常见于急性胰腺炎，从发病2小时开始血清淀粉酶活性迅速上升，12～24小时达最高峰，大多在参考范围上线四倍以上，3～4天恢复正常。发病后多在上高的窗口期进行检查时，90%以上急性胰腺炎患者可测出血清淀粉酶活性升高。若症状减轻可使酶释放量减少，或因病情恶化胰腺受到实质性破坏，淀粉酶含量可能正常或可能下降至正常值以下。血清淀粉酶持续性轻度增加时，必须考虑胰腺囊肿继发感染向慢性胰腺炎过渡，若有明显下降则预后不良。慢性胰腺炎淀粉酶升高不如急性胰腺炎淀粉酶升高显著，多为一过性，日间变化大。因此须反复测定血清淀粉酶，连续检查3天，从慢性胰腺炎发展成为胰腺萎缩、胰腺硬化时，血清淀粉酶活性则呈现出低值。胰腺癌患者的血清淀粉酶活性，并不一定经常出现异常，一般在早期时增高，到晚期则降低。一般认为在急性胰腺炎血清中淀粉酶活性会比较显著。
　　参考文献
　　[1]钟守先.胰腺外科.湖南科学技术出版社，1997：265-297.
　　[2]周新，府伟灵等.临床生物化学与检验（第4版）.北京：中国医药科技出版社人民卫生出版社，2011：119-120.