GC法测定盐酸美西律含量及其杂质2,6-二甲基酚

　作者单位:050011石家庄,河北省药品检验所
　　盐酸美西律(Mexiletine Hydrochloride)为钙通道阻滞剂,属Ib类抗心律失常药,临床上主要用于治疗急、慢性室性心律失常,如室性早搏、室性心动过速、心室颤动及强心苷中毒所致心律失常。其主要成分为(±)-1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-丙胺盐酸盐。2,6-二甲基酚为盐酸美西律的合成前体,经羟丙基化、氧化、缩合、氢化和成盐制得盐酸美西律。2005年版《中国药典》[1]采用高氯酸非水滴定法和TLC法分别作含量测定和杂质2,6-二甲基酚的检查。本研究参考文献[2,3]采用毛细管气相色谱法,同时对盐酸美西律含量及其杂质2,6-二甲基酚进行测定,该方法专属性强、灵敏度高、准确、简便。
　　1 仪器与试药
　　6890型全自动气相色谱仪(Agilent公司);盐酸美西律、2,6-二甲基酚对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号:100218-199601、100186-200201);盐酸美西律原料,A厂(批号:M071106,M071201,M071202,M050902);B厂(批号:M071106,M071107);C厂(批号:M060304)。甲醇为分析纯。
　　2 方法与结果
　　2.1 溶液配制 盐酸美西律对照品贮备液:精密称取盐酸美西律对照品12.5 mg 置50 ml量瓶中,用甲醇溶解并定容,摇匀。
　　2,6-二甲基酚对照品贮备液:精密称取2,6-二甲基酚对照品12.5 mg 置50 ml量瓶中,用甲醇溶解并定容,摇匀。
　　混合对照品溶液:分别精密量取盐酸美西律对照品贮备液和2,6-二甲基酚对照品贮备液各10 ml置25 ml量瓶中,用甲醇定容,摇匀。
　　供试品溶液(1):精密称取盐酸美西律0.5 g置10 ml量瓶中,用甲醇溶解并定容,摇匀。
　　供试品溶液(2):精密量取供试品溶液(1)5 ml置100 ml量瓶中,用甲醇定容,摇匀;精密量取2 ml置50 ml量瓶中,用甲醇定容,摇匀。
　　2.2 色谱条件 色谱柱DB-624毛细管柱(60 m×0.53 mm,3 μm);检测器 FID(氢火焰离子检测器),检测器温度250℃;柱温 200℃;进样口温度220℃;载气 氮气;流速 10.0 ml/min;分流比10∶1;进样量 1 μL。
　　空白溶液、混合对照品溶液和供试品溶液的色谱图见图1,结果显示空白溶液不干扰测定,2,6-二甲基酚、盐酸美西律的保留时间分别为3.19、6.25 min,理论板数均不低于15000且分离完全(分离度为22.9)。
　　2.3 GC法测定盐酸美西律含量
　　2.3.1 线性试验与检测限 精密量取盐酸美西律对照品贮备液1、2 ml置10 ml量瓶中,以及10、20 ml置25 ml量瓶中,用甲醇定容,配制成一系列浓度的溶液,分别进样测定,记录色谱图。以峰面积A为纵坐标、浓度c(mg/ml)为横坐标进行线性回归,得回归方程A=718.484c-0.723,r=0.9997。表明盐酸美西律在0.025~0.25 mg/ml浓度范围内线性关系良好。检测限为0.06ng。
　　2.3.2 精密度与重现性试验 取混合对照品溶液,连续进样6次,计算盐酸美西律峰面积的RSD为0.7%。
　　取同批样品,按“2.1”项下方法制得供试品溶液(2),共6份,分别进样,计算盐酸美西律含量的RSD为0.5%。
　　2.3.3 稳定性试验 取供试品溶液(2),分别于室温下放置0、2、4、6、8、12 h,进样测定,计算盐酸美西律峰面积的RSD为0.8%。
　　2.3.4 盐酸美西律测定 分别取混合对照品溶液和供试品溶液(2),进样测定,按外标法以峰面积计算样品含量,并与现行方法结果比较(表1),测定结果基本一致。
　　图1 气相色谱
　　A-空白溶液B-对照品溶液C-供试品溶液(1) D-供试品溶液(2) 1-2,6-二甲基酚;2-盐酸美西律
　　表1
　　
　　GC法与非水滴定法测定结果对比(%)
　　Lot No.non-aqueous titrationGC
　　M07110699.74100.11
　　M071201100.51100.25
　　M071202100.5899.96
　　M050902100.62100.98
　　M071106100.1499.87
　　M071107100.30100.49
　　M060304100.2899.88
　　2.4 GC法测定2,6-二甲基酚限度
　　2.4.1 线性试验与检测限 精密量取2,6-二甲基酚对照品贮备液1、2 ml置10 ml量瓶中,以及10、20 ml置25 ml量瓶中,用甲醇定容,配制成一系列浓度的溶液,分别进样测定,记录色谱图。以峰面积A为纵坐标、浓度c(mg/ml)为横坐标进行线性回归,得回归方程A=672.584c-0.901,r=0.9995。表明2,6-二甲基酚在0.025~0.25 mg/ml浓度范围内线性关系良好。检测限为0.05ng。
　　2.4.2 精密度与重现性试验 取混合对照品溶液,连续进样6次,计算2,6-二甲基酚峰面积的RSD为0.9%。
　　取同批样品,按“2.1”项下方法制得供试品溶液(1),共6份,分别进样,计算2,6-二甲基酚含量的RSD为0.6%。
　　2.4.3 稳定性试验 取混合对照品溶液,分别于室温下放置0、2、4、6、8、12 h,进样测定,计算2,6-二甲基酚峰面积的RSD为0.9%。
　　2.4.42,6-二甲基酚限度测定 分别取混合对照品溶液和供试品溶液(1),进样测定,仅批号M071106原料中2,6-二甲基酚含量为0.013%,其他批号样品未检出2,6-二甲基酚;按照《中国药典》2005年版TLC法检查盐酸美西律原料中杂质2,6-二甲基酚,结果供试品均无杂质斑点。由此可知,GC法测定盐酸美西律中已知杂质2,6-二甲基酚,方法灵敏度高。
　　3 讨论
　　3.1 本研究选择甲醇作溶剂,与盐酸美西律、2,6-二甲基酚均能互溶,且不干扰测定。盐酸美西律的熔点为200℃~204℃,2,6-二甲基酚的熔点为49℃,DB-624色谱柱的最高使用温度260℃,本试验的柱温为200℃,可有效避免柱流失。调整分流比为10︰1,峰形良好,灵敏度符合要求。
　　3.2 《中国药典》2005年版规定:TLC法检查盐酸美西律原料中杂质2,6-二甲基酚限度为0.2%,TLC法有一定的误差和局限性,其灵敏度较低;采用GC法测定2,6-二甲基酚,方法灵敏度高,可有效控制药品质量。
　　3.3 《中国药典》2005年版盐酸美西律原料含量测定采用高氯酸非水滴定法,操作时需加入乙酸汞,污染环境;本法准确、灵敏、快速,环境污染小,成本低,可用于盐酸美西律及其制剂的质量控制。
　　
　　参考文献
　　[1] 中国药典[S].2005年版.二部:550-551.
　　[2] 韩英松.程序升温气相色谱法测定樟脑乳膏中主药的含量.中国药房,2009,20(25):1992-1993.
　　[3] 贾首时,王淑杰,赫修洁.RP-HPLC法测定普鲁卡因肾上腺素注射液中盐酸普鲁卡因含量及其杂质对氨基苯甲酸.中国药品标准,2008,9(4):295-296. (责任编辑：nylw.net)转贴于八度论文发表网: http://www.8dulw.com(论文网__代写代发论文_论文发表_毕业论文_免费论文范文网_论文格式_广东论文网_广州论文网)